使用離心濃縮管進(jìn)行緩沖液交換或樣品濃縮時(shí)需要對(duì)方案進(jìn)行優(yōu)化,并正確操作設(shè)備及配套移液器,以確保避免污染的情況下,獲得準(zhǔn)確的產(chǎn)量測(cè)量值并在長(zhǎng)濃縮管中回收全部體積的樣品
為確保達(dá)得到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
可按照如下5個(gè)步驟進(jìn)行操作
1、使用手動(dòng)移液模式測(cè)定產(chǎn)量
電動(dòng)移液器的手動(dòng)移液模式方便用戶通過調(diào)節(jié)輪來控制吸液和排液,從而確定未知樣品的體積。
2、選擇合適的移液器吸頭
在避免污染的同時(shí)吸取長(zhǎng)管內(nèi)的液體可能挑戰(zhàn)性。因此,使用正確類型的移液器吸頭以及帶角形死端收集器的濃縮管可確保盡可能回收濃縮液。建議使用加長(zhǎng)型移液器吸頭,因?yàn)槠溟L(zhǎng)度可確保移液器無(wú)需被伸入濃縮管。同時(shí),使用低吸附吸頭有助于zui大限度回收表面張力低的液體樣品。
3、調(diào)整移液速度
通過將移液器的速度設(shè)置調(diào)整為慢速,可以防止形成泡沫和氣泡。
4、進(jìn)行離心濃縮
準(zhǔn)備Vivaspin® 濃縮管,完成膜清洗和超濾管鈍化后,使用離心機(jī)進(jìn)行濃縮。濃縮時(shí)間由所需的濃縮系數(shù)及相對(duì)離心力(RCF)而定。
5、測(cè)定容積得率
將Picus® 移液器設(shè)置為手動(dòng)模式,將吸液速度設(shè)置為3,排液速度設(shè)置為3。吸入時(shí),確保將吸頭置于液體表面之下,同時(shí)要避免吸頭太靠近底部。將所有液體吸入吸頭后立即松開調(diào)節(jié)輪,觀察容器底部是否有殘余液體聚集,再讀取移液器顯示屏上的總吸入量。zui后將排空。